植物组织培养技术知识结构。
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紫叶稠李是优良的园林绿化树种。辽宁林业职业技术学院林盛教学基地于2003年4月从北京植物园引人紫叶稠李，经过引种观察，树体健壮，生长速度较快，3a生树高达2.5m，地径2.8cm;抗寒性强，2003年1月和2005年1月园地气温达到-27.1℃和-29.0℃，无冻害发生;枝条密度是大，叶片卵状长椭圆形，长度达12cm，尤其突出的是叶片在生长季表现为深紫色，用做行道树、庭荫树和园景点缀，具有较高的观赏价值。张宝刚等对紫叶稠李进行了芽接、枝接、扦插等方面的研究，取得了一定的成果为了在短期内获得大量的紫叶稠李苗木。满足绿化需求，笔者进行了紫叶稠李的组织培养研究，为进行工厂化育苗提供基本技术数据。更多绿色尽在植物59网
1、材料与方法
1.1材料来源
试验材料为辽宁林业职业技术学院林盛教学基地从北京植物园引入的生长良好、无病虫害的紫叶稠李。
1.2外植体选用
取生长健壮、无病虫害的紫叶稠李冬眠枝或刚刚萌动的枝条，切成带有一个顶芽或侧芽的茎段。
1.3外植体的灭菌处理
灭菌流程：小茎段一流水冲洗(30Min)洗涤荆溶液浸泡(10Min)流水冲洗(30min)(以下工作在超净工作台完成)75％酒精浸泡30s无菌水冲洗2次(1min1次)0.1％HgCl2浸泡(8min)无菌水冲洗6次(2min1次)。
1.4试验方法
1.4.1不同激素配比对紫叶稠李初代培养的影响。基本培养基为MS＋蔗糖30g/L＋琼脂6g/L(pH5.8)，其中加入不同质量浓度的6-BA(设O.20、O.40、0.60、O.80、1.00mg/L质量浓度梯度)和NAA(设0.00、0.05、O.10mg/L一3个质量浓度梯度)作为初代培养的脱分化培养基，然后将消毒处理后的茎段接种在其中进行培养观察。
1.4.2不同激素配比对紫叶稠李再生嫩茎增殖的影响。
将初代培养获得的小植株除去叶片后再切成小茎段，接种到附加不同质量浓度的6一BA(0.50、1.00、2.00mg/L)、NAA(0.05、O.10、0.20Mg/L)和GA3(0.00、0.50、1.00mg/L)的继代分化培养基上(基本培养基同初代培养基)，4周后观察增殖状况，并统计结果。
1.4.3不同生长素组合对紫叶稠李生根的影响。
以l/2MS＋蔗糖20g/L＋琼脂7g/L(pH5.8)为基本培养基，其中加入不同质量浓度的NAA(0.00、0.10、0.50、1.00mg/L)和IBA(O.00、0.10、O.50mg/L)作为生根培养基;将继代培养得到的株高在1.5~2.0cm的嫩茎转人生根培养基中。20d后观察生根状况，并统计结果。
以上培养基均在12l℃条件下灭菌20min。培养温度为202℃，光照12h/d，光强为20003000lx。
1.4.4生根苗移栽。当生根培养的小苗根长为1.52.5cm时。开瓶在温室炼苗7d，移栽前3d用50％可湿性多菌灵800倍液喷浇灭菌。试管苗移栽基质为珍珠岩＋泥炭土和蛭石＋草炭土两种，每种基质中2种材料的体积比均为l：l。每种基质移植小苗l000株。
2、结果与分析
2.1激素配比对紫叶稠李初代培养的影响
试验发现。紫叶稠李顶芽和侧芽的分化能力均较强，培养2周后逐渐分化出小植株。30d后部分小植株的叶腋处又分化出新的小植株。
由表l可知，不同激素配比对外植体的分化有显著影响，在MS＋6一BA1.00mg/L＋NAA0.10mg/L培养基中，小植株分化数量最少;而在MS＋6一BAO.60mg/L＋NAA0.1mg/L培养基中。小植株分化数量最多，质量最好，分化率达到100.00％。可见，适宜的激素配比是诱导外植体分化的关键因素。
2.2激素配比对紫叶稠李再生嫩茎增殖的影响
由表2可知，增殖培养结果因激素配比不同而异，嫩茎增殖倍数随细胞分裂素质量浓度的增加而降低，以MS＋6一BA0.50mgL。1＋NAA0.05mg/L＋GA30.50mg/L增殖倍数最高，达到8.17倍，且苗芽生长健壮。
2.3不同生长素组合对紫叶稠李生根的影响
由表3可知，以l/2MS＋IBA0.50mg/L培养基的生根效果最好，每个试管苗生根35条，长度约1.52.5cm。生根率达到100％。
2.4基质对紫叶稠李生根苗移栽的影响
在生根植株培养阶段，对生长健壮的生根苗进行炼苗移栽。移栽后浇一次定根水。以后保持基质湿润，温度保持在20℃左右，初期适当遮荫。移栽后约15d的缓苗期过后，植株发出新根开始正常生长。
试验所使用的2种混合基质对移栽成活率的影响不显著，但对小苗后期生长速率有影响。移栽30d后统计珍珠岩＋泥炭土和蛭石＋草炭土的平均苗高分别为9.5cm和12.3cm。由此可见.蛭石＋草炭土做移栽基质更适合试管苗的生长。
3、结论
在紫叶稠李组织培养过程中。6一BA与NAA的配比对外植体的诱导具有显著影响。在初代培养阶段，MS＋6-BAO.60mg/L＋NAA0.05mg/L培养基对外植体的脱分化效果最好，分化率达到100.00％。在继代增殖培养阶段。MS＋6一BA0.50mg/L＋NAA0.05mg/L＋GA30.50mg/L培养基的增殖倍数最高，达到8.17倍，且苗芽生长健壮。在生根培养时，l/2Ms＋IBA0.50mg/L培养基的生根效果最好，生根率达到100％，且苗形美观，色泽深绿，移栽后生长旺盛。在移栽阶段，在蛭石＋草炭土(体积比为1：1)基质中，移栽30d后平均苗高为12.3cm，有利于试管苗移栽的成活与后期生长。
延伸阅读
稠李可以吃吗 紫叶稠李缘何这么热？
稠李因垂枝、花叶、大花、小花、黄果，红果等变种，具有观赏的价值。花序长面美丽，秋天叶子变红色，果实成熟后呈亮黑色，是一种耐寒性强的观赏树。
营养作用：稠李果实含有大量的蛋白质与苹果大体一样，还有有机酸和矿物质。除了可以生吃以外，它主要被人们用来加工果汁、果酒等产品。稠李的种子还可提炼工业用油。叶子可以用药，治疗止咳，还有杀虫作用。果味甘涩，可止泻、补脾。东北紫叶稠李为何这么热“在开原甚至整个辽宁，只要是想出手的苗都能够找到买家，采购商的口头禅普遍是‘价格好商量’。”对于上半年东北地区紫叶稠李的行情，辽宁省开原市绿动园林苗木繁育基地总经理王宇是这样形容的。与其他乔木只是大苗热销不同，今年紫叶稠李不仅胸径五六厘米的大苗供不应求，单价超过每厘米百元，就连2厘米粗的一年生苗也严重缺货，价格飙升至40元左右。到底是什么原因让紫叶稠李火成这样?品种特性无法替代“在东北地区，除了紫叶稠李，能用于绿化的红色叶大乔木没有第二选择。”辽宁资深园林专家李作文认为，紫叶稠李的叶色并非完美的红色，相比很多华东地区的红叶树种，它的红色叶片很暗。但是，东北地区的彩叶树种中，金叶的选择较多，如金叶复叶槭、金叶榆、金叶白蜡等，且可通过高接糖槭、白榆、白蜡获得较大规格的苗。而红叶品种虽说有王族海棠、俄罗斯红叶李、密枝红叶李，但无奈树高前两者太矮，后者存圃苗多为绿篱和球，乔木类苗极少。“所以目前，东北地区要想在行道树、庭园树领域使用红色叶树种，就只能选择紫叶稠李。”在具有红色叶大乔木特性之外，紫叶稠李的适应性也非常强，耐寒、较耐旱，北至寒冷的黑龙江、西至干旱的新疆、宁夏，都生长良好，景观效果出众。海城华润苗圃总经理范影表示，紫叶稠李通直的树干、丰满的树形、速生的特点、广泛的适应性等优势，都是它能在东北和西北地区流行开来的原因。“现在在海城，胸径5厘米的苗，从去年的每株250元至270元，涨到四五百元甚至更高。胸径4厘米的苗，也卖到220元至230元。胸径6厘米的苗，几乎找不到了。”“北京及以南地区种植紫叶稠李，‘流胶’问题比较严重，东北则好很多，几乎可以忽略。”范影说，和枫树、杨树、槐树等比起来，它的树干要光滑很多，具有一定观赏性。另外，紫叶稠李开花清香，果实看着也挺美观。“在加拿大，我曾见过高十六七米的紫叶稠李大树，作行道树相当壮观。”紫叶稠李在哈尔滨属于高端树种，一般只有精品工程才会使用大苗进行点缀，行道树绿化是用不起的。”哈尔滨和平绿化公司董事长任步均说，目前，当地胸径3厘米的苗，能卖到100元以上。稠李在我国东北地区极具是一种极具观赏性的落叶乔木。特别是稠李花开的时候，特别的漂亮，花序长而下垂，花色白如雪，要是街道边一排排的稠李树开花，那是多么的壮丽啊。到了秋天叶子全部变为黄色，也是极为漂亮的。蝴蝶兰的组织培养技术
蝴蝶兰为兰科多年生附生草本，又名蝶兰，是兰科植物中栽培最为广泛的种类之一，主要分布在热带及亚热带地区。其花形奇特，色彩艳丽，花期持久，素有兰中皇后的美誉，具有极高的观赏和经济价值，在国内外花卉市场上极受欢迎。蝴蝶兰是单茎气生兰，植株上极少发育侧枝，比其他种类的兰花更难于进行常规无性繁殖。组织培养是建立蝴蝶兰快速繁殖无性系的重要手段。
1外植体的选择
蝴蝶兰的茎尖、茎段、叶片、花梗侧芽、花梗节间、根尖等部位都已有培养成功的报道，方法各异，难度各有高低。蝴蝶兰不同外植体的成活率有差异，其中花梗侧芽的成活率最高，达75％;其次为花梗，成活率为62.5％;叶片和根尖最差，分别为12.5％和7.5％。针对不同外植体，取材方法也不同，通常取花梗节之间1~2cm长的幼嫩部分，切取长2~3mm的切段作为外植体。
2基本培养基的选择
蝴蝶兰组织培养所采用的基本培养基包括MS、1/2MS、VW、B5、KC、花宝及其改良型等，其中1/2MS对蝴蝶兰原球茎增殖效果最好。
3外源激素的选择
目前常使用的外源激素主要是生长素类(如IAA、2，4-D和NAA)和细胞分裂素类(如BA、ZT、KT)。蝴蝶兰组织培养中常用的细胞分裂素为6-BA，较高浓度(1~8mg/L)的6-BA能促进蝴蝶兰原球茎增殖，较低浓度(0.1~0.5mg/L)的6-BA则能促进原球茎分化。适宜浓度的6-BA配合较低浓度的NAA，更有利于原球茎的增殖，2.0mg/L6-BA和0.3mg/LNAA配合使用是蝴蝶兰原球茎增殖的最佳组合。
4培养基添加物对蝴蝶兰增殖和分化的影响
蝴蝶兰组织培养中常加入一些天然物质如椰乳、香蕉泥、番茄汁、苹果汁等，这些物质能提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等，如加入100~200mg/L香蕉泥，具有较大的pH缓冲作用，有利于兰科植物的壮苗和生根。许多资料也表明，添加适量的香蕉泥、椰乳或含胶质的果菜汁等均对原球茎增殖有明显促进效果。
适量的添加物对蝴蝶兰丛生芽的诱导和生根也有一定的促进作用。培养基中添加活性炭，低浓度(0.5~1.0g/L)时对原球茎增殖影响不明显，但可促进蝴蝶兰生根;高浓度(2.0~3.0g/L)时对原球茎增殖有促进作用，但原球茎有黄化现象。
蔗糖作为培养基的能源物质和渗透调节剂，对原球茎的增殖生长影响较大。蔗糖含量为2％时，原球茎分化速度最快;蔗糖含量为2％~3％时，促进芽的形成;蔗糖含量为5％时，有利于根的分化和生长。蔗糖含量为3％~5％时，抑制原球茎的分化和生长，分化质量和分化速度都显著下降。
5原球茎继代中褐化的防治
蝴蝶兰和其它兰科植物一样，原球茎状体在继代培养过程中易褐变死亡，不易增殖。在培养基中添加1~2g/L活性炭，适时切除培养物的褐化部分并及时更换新鲜培养基，能有效抑制外植体褐变死亡;培养基中加入10％椰子水，也能促进原球茎的生长，减少原球茎增殖过程中的褐变。蝴蝶兰的群体效应很明显，单芽容易褐化死亡，且增殖较慢，因此，刚诱导出的原球茎状体不能过早切割转移，在继代阶段接种时，应尽量避免切成单芽，增殖时切块也不宜过小，否则容易褐化死亡。6~8月份高温季节采芽排出的褐变物质多，成活率也最低，所以要避免在夏季采芽。
6外界条件对蝴蝶兰的影响
培养基的pH值直接影响到培养物对离子的吸收，过酸或过碱都对植物材料生长有很大影响，此外，琼脂培养基的pH还影响到凝固情况。原球茎在pH值5.0~5.4的环境中生长最好，丛生芽的诱导与增殖在pH值5.6~5.8的环境中较好。
蝴蝶兰在组织培养中，通常都以日光灯为光源，因此，可以人为地进行控制其光照强弱。光照强度对试管苗发根和生长势均有明显的影响。光照为3000lx对蝴蝶兰根诱导和植株生长有利。
在诱导蝴蝶兰丛生芽过程中，由于所取的花梗芽为花芽，在培养过程中，较低的温度影响(15~22℃)会使大部分花梗芽发育成花芽;在较高温度(23~26℃)下培养，花梗花芽转化为营养芽，所以在进行蝴蝶兰丛生芽诱导时的适宜温度条件为(252)℃。
7生根壮苗及移栽
生根壮苗阶段关键在于严格筛选激素的种类和浓度，一般需降低培养基的激素含量，以便形成健壮苗。常用的生长素有IBA(0.3~1.5mg/L)、NAA(0.1~0.8mg/L)。添加GA30.1mg/L＋NAA0.1mg/L的组合能明显提高生根率，且植株健壮，长势好。
蝴蝶兰属热带气生兰，具气生根，栽培上要求根部通气良好。现在蝴蝶兰移栽常用基质有水苔、椰糠、蛇木、树皮等，以水苔效果较好。
综上所述，用组培方法快繁蝴蝶兰较传统繁殖方法有3个明显的优点：①节省育苗用地;②节省繁殖材料，提高繁殖系数;③利用茎尖脱毒培养，挽救因受病毒侵染而退化的优良品种，提高质量和欣赏价值。总之，组培快繁技术可大大提高生产效益和经济效益。
红豆杉的组织培养
红豆杉是常绿乔木，小枝秋天变成黄绿色或淡红褐色叶条形，雌雄异株，种子扁圆形。种子用来榨油，也可入药。属浅根植物，其主根不明显、侧根发达，高30米，干径达1米。叶螺旋状互生，基部扭转为二列，条形略微弯曲，长1～2.5cm，宽2～2.5mm，叶缘微反曲，叶的端缘渐尖，叶背有2条宽黄绿色或灰绿色的气孔带，中脉上密生有细小凸点，叶缘绿带极窄，雌雄异株，雄球花常单生于叶腋，雌球花胚珠单生于花轴上部侧生短轴的顶端，基部有圆盘状的假种皮。种子扁卵圆形，有2棱，种卵圆形，假种皮杯状，红色。因为红豆杉的树皮有抗癌物质紫杉醇，所以有许多人进入林中来剥树皮，使得红豆杉的数量急剧下降。
红豆杉的组织培养技术
(一)、材料
较为适宜的组培外植体为新生的嫩枝，取材时间以每年的7、8月份为宜
(二)培养过程
1、愈伤组织诱导用培养基
培养基的基本成分采用B5或MS的微量元素、有机物和铁盐，外加KNO32500mg/L，NH4NO3825mg/LKH2PO4240mg/L，MgSO4?7H2O370mg/L，CaCl2?2H2O660mg/L。添加的激素种类及数量为NAA0.8-1.0mg/L、BA0.3-0.5mg/L，调PH值为5.8-6.0;琼脂粉和蔗糖用量分别为5.6-6.0g/L和30g/L。配置好的培养基用培养瓶分装，经高温、高压灭菌后备用。
2、材料消毒与接种
取新生的嫩枝(带有针叶)放入加有0.02％洗洁精的自来水中浸泡10分钟，浸泡过程中需经常搅动，浸泡结束后用自来水冲洗10分钟以上。将嫩枝转入一干净的三角瓶中。
以下所有操作必须在超净工作台上进行无菌操作。首先往三角瓶中加入75％的酒精，加入量应为嫩枝体积的10倍以上，浸泡杀菌30-60秒，倒掉酒精，用无菌蒸馏水年漂洗一次;再将嫩枝转入事先已高压消毒的三角瓶中，加入15倍与嫩枝体积的0.1％的升汞溶液，浸泡杀菌5-8分钟，浸泡过程中要不断摇动，以使升汞与嫩枝充分接触。为了达到彻底杀菌的效果，有人建议在升汞溶液中加入0.02％的表面活性剂，这样可能更好一些，但要相对缩短杀菌时间。倒掉升汞溶液，用无菌蒸馏水冲洗4-6次，每次1-2分钟，以彻底除去升汞。将嫩枝从三角瓶中分批取出，用无菌滤纸吸去材料表面的水分，将嫩枝切成0.5-0.8CM的小段，并切取部分针叶，嫩枝切段和针叶同时用作外植体，接种在诱导愈伤组织的培养基上。接种时要让针叶的腹面接触培养基，嫩枝的植物学近地端接触培养基。注意用过的升汞溶液和冲洗液不要到处乱倒，以防重金属污染。将接种好的培养物放置于培养室中培养，温度(252)℃，光照强度1500-2000lx，光照时间10h/d。
3、愈伤组织诱导
红豆杉嫩枝和针叶在培养基上2-3周后即开始形成愈伤组织，约4-5周愈伤组织直径可达1-2CM。不同种的红豆杉和不同的外植体之间形成愈伤组织的比率、时间早晚和生长速度存在明显差异，南方红豆杉和东北红豆杉的嫩枝切段出愈较快，出愈率分别为89％和70％，针叶出愈较慢，出愈率也较低，分别为36％和15％;普通红豆杉出愈较慢但出愈率较高，嫩枝和针叶的出愈率分别为94％和30％。愈伤组织开始时为灰白色，随着愈伤组织的增大，先期形成的愈伤组织颜色由灰白色变为棕色，这可能预示着愈伤组织在逐渐发生褐变，因此要及时给予注意，尽量保持较低的培养温度和经常更换培养基。当愈伤组织生长到一定大小时即可转入液体进行悬浮培养。
4、细胞悬浮培养与继代
利用愈伤组织而不是用小苗或大树来生产提取紫杉醇，是一条正在探索的途径，如果成功则可以实现工厂化生产，从根本上解决红豆杉资源不足的矛盾。因此，通过嫩枝和针叶培养产生的愈伤组织不需要进行芽分化的诱导，而是将愈伤组织直接转入细胞悬浮培养。具体做法是将从嫩枝和针叶上产生的愈伤组织取下来直接转入液体培养基中进行振荡培养，所用培养基与上述诱导培养基相同。在初次将愈伤转到液体培养基即可适当加入少量纤维素酶和果胶酶，以加快愈伤组织分离成单个细胞或小细胞团。
在初次悬浮培养阶段可用50ml的小三角瓶，每瓶加10ml液体培养基，放入愈伤组织，在20-23℃的摇床上振荡培养，光照条件与普通培养相同。每周需要更换一次培养基，更换时用5-10ml的平头移液管将三角瓶中的愈伤组织、单个细胞或细胞团过滤出来，直接转到新鲜的培养基中即可。在悬浮培养过程中应随时注意每一瓶中愈伤组织、细胞团生长的情况，挑选生长速度最快和特征最好的作为继代的材料，毫不可惜的丢掉那些不好的(生长缓慢、颜色不正等)材料，这样经过几代的选择，就可以挑出符合理想的材料，作为悬浮系进行扩增培养。
用植物组织培养这种先进的培养方法，能够迅速、大量的生产出目前人类急需的红豆杉，能够为癌症的治疗提供很大的方便，社会以及积极效益都非常的明显。
新几内亚凤仙的组织培养
凤仙是凤仙花科凤仙花属多年生常绿草本植物。新几内亚凤仙是凤仙花家族中的一个新品种。它花色丰富，四季开花，花期长，叶色独具特色，作为周年供应的时尚盆花，日益受到了人们的青睐。它的传统繁殖方法是通过播种繁殖，但播种繁殖需要恒定的温度，而且种子价格比较昂贵，发芽率低。近年来，用无性繁殖，利用组织培养技术，既可以在短期内取得大量的优质脱毒苗，又可避免因常规无性繁殖而导致的种性退化。具体可用新几内亚凤仙的茎段作为外植体，对其进行离体快速繁殖。
材料与方法
试材处理
从新几内亚凤仙植株上剪取带有腋芽的嫩梢，去掉叶，先用自来水冲洗10分钟，再用洗洁剂溶液洗涤1－2次。在无菌条件下，依次用70%的酒精浸泡30秒钟，2%的次氯酸钠浸泡12分钟，无菌水冲洗3－5次。最后将处理好的嫩梢切成每个节间约0.5cm长的带芽茎段接种在预制好的初代培养基上。
培养条件
分化培养基的选择
以MS作为基本培养基，分别设置BA0.5、1.0、1.5、2.0mg/L,NAA0.2、0.4、0.6、0.8mg/L各4种浓度，共16个组合。筛选分化培养基中BA和NAA最佳组合，3次重复。各培养基组合均加入蔗糖3%－4%，琼脂6－8g，Ad30mg/L，调PH值为5.8。
生根培养基的选择以MS为基本培养基，设置IBA0.3、0.6、0.9、1.2、1.5mg/L5种浓度，摸索最佳生根条件。各培养基均加入蔗糖2%－2.5%，琼脂6－8g，调PH值为5.8。
继代培养
新接的外植体约30天萌发成苗，苗高2－3cm时，将小苗剪成0.5cm长带芽茎段，放入分化培养基中继代培养。生根培养
小苗高3cm左右时，从基部剪下，接种于生根培养基上，进行生根培养。
小苗移栽
小苗生根培养根长达2cm时，进行移栽，先移入温室中炼苗1－2天，温室中培养2－3周后上盆。
结果与分析
不同浓度的BA和NAA组合对新几内亚凤仙分化出苗的影响以MS作基本培养基，4种浓度BA和4种浓度NAA组合，对新几内亚凤仙出苗影响。
结果表明：芽的增殖和嫩梢的增长不仅取决于BA、NAA的绝对数量，而且取决于二者相对比例。浓度最大BA/NAA条件下，繁殖系数17达最大，而且嫩梢生长度也达到最大1.23，浓度最小BA/NAA条件下，繁殖系数、嫩梢长度之比为10/0.67，二者绝对值处于中间状态。综合芽的形成和嫩梢生长两种情况看：高浓度的BA（1.5－2.0mg/L）与NAA配合时，嫩梢生长较正常，平均株高1.09cm，增殖倍数为14，较低浓度的BA（0.5－1.0mg/L）与NAA配合时，繁殖系数为8.9，平均株高为0.68cm，长势不良，实验条件下以BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L效果为最佳。不同浓度的IBA对生根的影响
以MS为基本培养基，5种浓度IBA条件下生根效果见表2。结果表明：开始生根天数随IBA浓度加大而缩短，IBA浓度从0.3－0.9mg/L范围内，随浓度加大，生根率、每株根数增加，超过0.9mg/L，生根率下降。且多形成粗大根，产生愈伤组织或从愈伤组织上再生根。实验条件下，以0.9mg/L生根效果最好，生根较快，根系生长正常，根数较多。
小苗移栽
已生根小苗经20天，待根长达2cm时，取出试管苗，洗去根上琼脂，移至透水通气的蛭石中，先在培养室中温度20℃-25℃，相对湿度65%-75%条件下培养2-3周，然后移至散射自然光下炼苗1-2周，最后上盆进入温室，成活率可达95%以上。这期间除了注意保温保湿外，土壤湿度不宜太大，温度以23℃-25℃为好，注意采用杀菌剂保护，避免幼苗腐烂死亡。
结论
MS+BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L+Ad30g/L+蔗糖3%+琼脂8g/L,调PH值为5.8是新几内亚凤仙茎段培养较为理想培养基。继代培养天数约为30天左右，繁殖系数可达17，嫩梢生长正常。
在MS+IBA0.9mg/L+蔗糖2.2%+琼脂7g/L，调PH值为5.8的培养基上，新几内亚凤仙试管苗生根效果较好，生根率可达95.4%，根系发达，植株生长旺盛。
生根两周后的试管苗尚需炼苗2－3天，经培养室移植培养2－3周，自然光下1－2周炼苗可上盆入温室，成活率达95%以上，小苗成活关键是基质选择及温、湿度控制。
紫叶李的栽培养护技术
紫叶李，又名红叶李，是蔷薇科李属落叶小乔木樱李的变形，树冠圆形或扁圆形，小枝红褐色。叶卵形或倒卵形，边缘具重锯齿，叶紫红色。花单生或2～3朵聚生，粉红色。果实近球形，黄绿色有紫色晕。花期在4～5月，果熟期6～7月。叶光滑，叶卵形至披针形，紫红色。花小，淡粉红色至白色。核果球形，紫红色。原产于亚洲西南部，现在华北及以南地区广为栽植，是园林绿化、观光果园的重要树种，现将其栽培管理技术介绍如下。
1、栽植环境的选择
紫叶李为暖温带树种，喜光，应种植于光照充足处，切忌种植于背阴处和大树下，光照不足不仅使植株生长不良，还会使叶片发绿。紫叶李耐旱、喜湿，但不耐积水，栽种于干燥之处可正常生长，在低洼处种植则生长不良。紫叶李对土壤要求不严，喜肥沃、湿润的中性或酸性沙质壤土，也能耐轻度盐碱土，在pH值为8.8、含盐量为0.2％的轻度盐碱土中能正常生长。紫叶李较耐寒，但也应该尽量种植于背风向阳处，尽量不要种植在风口。紫叶李的叶片为紫红色，种植时应注意不要顺色，颜色有差异方可显出叶色的美观。
2、水肥管理
紫叶李喜湿润环境，对于新栽植的苗除浇好三水外，还应于4月、5月、6月、9月各浇1-2次透水。7、8两月降雨充沛，如不是过于干旱，可不浇水，雨水较多时，还应及时排水，防止水大烂根。11月上中旬还应浇足、浇透封冻水。在第二年的管理中也应于3月初、4月、5月、6月、9月和11月上中旬各浇水1次。从第3年起只需每年早春和初冬浇足、浇透解冻水和封冻水即可，可靠天自然生长。需要注意的是：进入秋季一定要控制浇水，防止水大而使枝条徒长，在冬季遭受冻害。
紫叶李喜肥，除栽植时在坑底施入适量腐熟发酵的圈肥外，以后每年在浇封冻水前可施入一些农家肥，可使植株生长旺盛，叶片鲜亮。但需要说明的是，紫叶李虽然喜肥，但每年只需要在秋末施1次肥即可，而且要适量，如果施肥次数过多或施肥量过大，会使叶片颜色发暗而不鲜亮，降低观赏价值。
3、整形修剪
紫叶李最佳的树形是疏散分层形。这种树形，树冠开张且不失紧凑，而且主干明显，主枝错落有致。
紫叶李的整形一般分4年进行。第1年的修剪在栽植后进行，在主干0.8-1.2m处短截，剪口下的第1个芽作为主枝延长枝，另在第1个芽的下方选取3-4个粗壮的新生枝条作为主枝，枝条应均匀分布，可不在同一轨迹，但上下不应差5cm以上，且应呈450向上展开。主枝选定好后，在生长期要对其进行适当的摘心，以促其粗壮。第2年冬剪时，还应适当短截主枝延长枝，选取壮芽，在其上1cm处短截，芽的方向应与上年主干延长枝的方向相反，主枝也应进行短截，留粗壮的外芽。第3年冬剪时，主干延长枝再与第2年的主干延长枝方向相反，并选留第2层主枝，也同样保留外芽，长成后与第2年主枝错落分布。第4年照此法选留第3层主枝。
在实际工作中，自然开心形也应用较多。其修剪方法是：苗木定植后，在干高0.5-1m处对其进行短截，不使其生长成主枝延长枝，只选取3-5个新生枝条做主枝，所留主枝分布应大致均匀，且开张角度在450，然后按疏散分层形修剪主枝的方法来逐年进行修剪。这种树形虽不如疏散分散形美观，但比疏散分层形树冠通透性好，观赏效果也不错。
需要注意的是，不管是哪种树形，在对各层主枝进行修剪的时候，应适当保留一定数量的侧枝，使树冠充实而不空洞，在树形基本形成后，每年只需要剪除过密枝、下垂枝、重叠枝、交叉枝和枯死枝即可。
养花大全杜鹃花组织培养技术
杜鹃花为杜鹃花科杜鹃花属常绿或落叶小灌木，具有品种多、开花早、花色丰富、花期长等特点。近几年，由于扦插繁殖技术的发展，我国杜鹃花产量有了提高。但是，名贵品种因母本少、繁殖系数低，仍不能满足社会需要。而组织培养正是实现杜鹃花工厂化育苗的有效措施。下面将其简单介绍如下：
一、杜鹃花组培的基本技术环节
杜鹃花组织培养，通常使用的外植体为茎尖、茎节和花蕾等。因花蕾的分化较为困难，周期长;茎尖的取材受到一定限制，故国内多采用茎节为初代培养的外植体。
杀菌处理时，杀菌能力较强的升汞(氯化汞)易造成外植体材料的褐变死亡，不宜使用。试验表明，采用饱和的次氯酸钙液上清液或5％的次氯酸钠液作为灭菌剂，效果较好，处理时间为15至20分钟。为加强灭菌效果，还可加入1％的克菌丹或0.1％的吐温-20(山梨糖醇)配合使用。材料灭菌前的预处理，通常采用70％酒精浸泡，不超过30秒。此外，用中性洗涤剂进行材料的预处理，亦可有效降低其灭菌后的污染率。外植材料灭菌流程为：洗衣粉液浸泡20分钟?流水冲洗至清?70％酒精浸泡30秒?灭菌水冲洗1分钟?5％次氯酸钠浸泡15分钟?灭菌水漂洗3次，每次1分钟。如此，可将外植体污染率降低到15％以下。
杜鹃花组培所用培养基，为Andeson改良MS培养基：将MS培养基中的硝酸铵和硝酸钾用量分别减至1/4，取消了碘化钾成分，铁盐的用量增加一倍。因杜鹃花科植物原产于高山酸性土壤，培养基的pH值宜为5.0至5.4。培养室温度25℃，光照强度3000勒克斯，光照时间12至14小时。
杜鹃花在诱芽培养中使用的激素较一般植物有异，需要活性较强的细胞激动素类物质，才能达到满意的效果。试验表明，使用ZT的诱芽效应最为显著;添加KT的处理几乎无丛芽或侧芽发生，仅是原茎尖的伸长;而选用6-BA处理，则导致培养材料的褐变加剧，效果反不如对照。此外，在其后的增殖培养中，杜鹃花对细胞激动素种类的要求，仍以添加ZT为好。
国外在杜鹃花的组培中多使用2ip作为外源细胞激动素，效果较ZT好。但从经济的角度考虑，仍推荐使用ZT。
二、杜鹃花的初代和继代增殖培养
杜鹃花初代诱芽培养，NAA浓度不得超过0.1mg/L，ZT用量的增大对诱芽效应有明显促进作用。但提高ZT浓度时，NAA浓度不宜同步增加，ZT/NAA值较大为好。从经济培养的意义出发，初代培养的激素配比以ZT5＋NAA0.01(mg/L)为宜，培养1个月左右时，诱芽率即可达100％，诱芽系数6.5。
杜鹃花继代增殖培养，对细胞激动素要求比初代培养有所下降。虽然增殖效应仍随ZT用量的增加而上升，但已不如初代培养时那么明显。此外，用于增殖培养的材料性质不同，其增殖效应也不尽相同，品种间亦存在显著的差异性。供试品种中，小桃红以采用丛芽为增殖培养体时的增殖系数较高(7.6);而花春雨则反之，以取用芽条时的反应为佳(7.5)。
杜鹃花组织培养，从接种到诱芽产生，所需的时间明显长于月季和菊花等，故其继代增殖培养的周期也较长。试验中分别以30天和45天为培养周期进行了统计，在各激素水平配比处理中，其增殖芽总数，培养45天要比培养30天的高出50％至80％。所以，杜鹃花组培过程中，过于频繁地切割、转换培养，反达不到快繁的目的。
三、试管苗的生根培养及移栽
杜鹃花的生根培养虽不十分困难，但对培养基的要求仍与一般植物不同。其一，基本培养中无机盐大量元素的用量不能减半;其二，蔗糖的用量仍为30g/L，生长素NAA的添加量以1.5至2.0mg/L为好，培养45天时的生根率为60％左右。
供生根培养的试管苗，要求高15厘米以上，具7片以上真叶，发育健壮。生根培养2周后始见发根，6周时达最高生根率。试验中曾发现，在增殖培养过程中用KT或6-BA取代ZT时，虽诱芽、增殖效应较差，但芽条发育较粗壮。因此，在增殖培养达到一定群体数量后，用KT或6?BA进行继代培养处理，可使生根率和移栽成活率明显提高。此外，在生根培养基中添加2g/L的活性炭，可使试管苗个体发育显著增强，1个月后生根率可达到90％以上。
国外的研究资料表明，某些常规繁殖(扦插)极难生根的植物，经组织培养后获得的试管苗，生根会容易很多。有些可不经生根培养直接移植到生根介质中，生根率可达100％，3至4周后即可移入温室进行盆栽。这种生根介质为泥炭土、蛭石、珍珠岩的混合物，pH以4至4.5为宜。
生根试管苗的移栽入土，栽培基质为1∶1的泥炭生＋蛭石混合物。表层要求过筛，以利根系附着;下层铺粗粒，以利基质渗水。移栽时用镊子去掉根部附着的培养基(不可损伤根系)。用镊尖将基质拨一小洞，把根系放入，覆土，轻轻压实，浇足水。试管苗移栽成活的关键是保证一定的温、湿条件，移栽环境和试管培养时的条件相差悬殊，常造成移栽苗生长不适或死亡。
试管生根苗的移栽虽然在全年均可进行，但在不具备生根室的情况下，仍以春、秋两季进行较为稳妥方便。
四、组培技术在杜鹃花新品种选育中的应用
试验初期，鉴于杜鹃花外植体灭菌困难，可供试验的接种群体太小，不能满足正常试验的进行。为尽快筛选出合适的培养基配方及相应的培养条件，笔者结合杂交育种，采用杂交种子试管发芽的方法，再用试管实生苗的上胚轴为外植体进行研究，取得了事半功倍的效果。笔者发现，杜鹃花的杂种实生苗常规播种繁殖需3至5年才能开花，而经上胚轴培养的杂种实生苗，移栽后第二年即可开花，大大缩短了杂种实生苗的童期，对加快显花、结果类植物的育种进程具有重要意义。
一般来说，种子的灭菌处理较其他器官或组织容易得多。杜鹃花杂交种子的灭菌处理为：70％酒精表面浸泡1分钟，灭菌水漂洗后转0.1％升汞液浸泡10分钟，灭菌水漂洗3次，每次1分钟以上。灭菌后再剖实取籽、接种培养，接种两周始见发芽。出苗后取用上胚轴进行诱芽快繁，繁殖系数较高。成苗后，可取茎尖或茎节再培养，培养条件和方法同前。国内组织培养涉及新品种选育的不多，特别是在观赏园艺植物方面。从发展的角度看，组培技术要保持较强的生命力，就不该离开新品种的选育。因此，有机地将组培技术与杜鹃花新品种选育结合起来，对提高绿地植物景观的建设水平、促进杜鹃花的产业化发展，都是十分有益的。
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